Львів
C
» » Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

Сучасна медицина володіє методами специфічної діагностики, які дають можливість встановлювати етіологію захворювань у людей на підставі визначення збудника, генетично чужорідних речовин, що стимулюють імунну реакцію, нуклеїнових кислот, а також зрушень алергічного та імунного характеру, які відбуваються з-за його дії. Сьогодні в імунології та вірусології широко застосовується РІА, тобто радиоиммунный аналіз, постановки мети, компоненти, хід, облік якого, ми розглянемо в даній статті. Цей аналіз здатний визначати антигени в результаті їх взаємодії з антитілами.


Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

Визначення

РИА являє собою такий метод діагностування біологічно активних речовин в рідинах, в основі якого лежать реакції антигенів з антитілами при застосуванні мічених радіонуклідами аналогічних їм речовин, які мають особливі системи зв'язування. Після їх взаємодії утворюється імунний комплекс, який відокремлюють і вивчають його радіоактивність. Відомо, що радиоиммунный аналіз проводиться за допомогою стандартних наборів реагентів. Кожен реагент здатний визначити концентрацію одного конкретного речовини. Біологічна рідина, взята у людини, змішується з реагентом, після періоду інкубації відбувається поділ вільного та зв'язаного радіоактивної речовини, далі проводиться радіометрія і розрахунок результатів. Для мітки речовин застосовують ізотоп йоду. Його мітять і додають в певній кількості.
Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

Застосування

Радиоиммунный аналіз застосування має широке медицини та мікробіології. З його допомогою проводиться діагностика серцевих і судинних захворювань, хвороб ендокринної та інших систем організму. Також часто РИА використовуються для виявлення причини безпліддя, патології розвитку плоду. В онкології цей аналіз проводять з метою визначення маркерів новоутворень, щоб мати можливість контролювати ефективність лікування. В імунології РИА застосовується для дослідження наявності в крові імуноглобулінів, ферментів, білків і так далі. Сьогодні даний аналіз дозволяє виявляти концентрацію різних гормонів до мільйонної частини одного грама. Таким чином, радиоиммунный аналіз крові широко застосовується в кардіології, онкології, ендокринології, гінекології та вірусології.


Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

Методи РИА

Прийнято розрізняти декілька методів аналізу, у залежності від характеру реакції:
  • Неконкурентний метод характеризується такими компонентами реакції, як стандартний і визначається антигени, буферний розчин, антитіла, що позначені ізотопом, визначені антитіла, що зв'язуються на сорбенті. До антитілам додають антиген, який досліджується. Після інкубації з'являються комплекси антиген-антитіло, сорбент омивають, додають позначені антитіла, що вступають у зв'язок з антигеном у складі комплексу. Радіоактивність залежить від концентрації антигену, що досліджується.
  • Конкурентний радиоиммунный аналіз обумовлюється конкуренцією антигену. Тут є такі компоненти реакції, як контрольний і визначається антигени, буферний розчин, визначені антитіла, що зв'язуються на сорбенті, а також антиген, помічений ізотопом. Діагностування починається з введення антигену, що досліджується. На сорбенті утворюється комплекс антиген-антитіло. Далі омивається сорбент, і вводять позначений антиген. При цьому він вступає у зв'язок з антитілом. За допомогою лічильників вимірюють реакцію і величину радіоактивності. Вона буде в зворотній пропорції щодо кількості антигену в пробі.
  • Непрямий метод є самим поширеним. У цьому випадку радиоиммунный аналіз компоненти реакції має такі, як контрольна і досліджувана сироватка, антигени або антитіла, які пов'язані на сорбенті, антитіла, позначені ізотопами, розчини буферів. Антитіла або антигени, що діагностуються, вступають в реакцію з антигенами або антитілами, які пов'язані на сорбенті. Потім видаляють инкубат, вводять позначені антитіла, що вступають у зв'язок з комплексами антиген-антитіло.
  • Методика проведення аналізу

    Так, радиоиммунный аналіз проводиться за допомогою спеціальних реагентів. Набори стандартні, тому будь-які похибки або порушення не допускаються. Результати діагностики виходять достовірними. Аналіз проводять вранці, для цього беруть у людини венозну кров. В лабораторії від крові сироватку відділяють, яка буде застосовуватися для РІА. Цю сироватку змішують з реагентами. Отримана суміш проходить інкубацію при заданій температури в термостаті.
    В отриманій суміші поділяють вільні і зв'язані ізотопи. Після цього отриманий матеріал досліджується, і прораховуються результати. Механізм радиоиммунного аналізу має кілька варіантів. Методика, що описана вище, є РИА рідиннофазної, так як всі компоненти мають рідкий стан. Є РИА і твердофазних, де антитіла кладуть на носій, який не розчиняється в рідині.
    Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

    Доступність діагностики

    Використання цього методу діагностики в медицині з кожним роком стає все популярнішим. Останнім часом радиоиммунный аналіз стає стандартним методом діагностики, який може бути призначений лікарем при постановці остаточного діагнозу. Довгий час цей вид аналізу проводився тільки в лабораторіях, сьогодні він став звичайним методом дослідження. Але РИА вимагає застосування дорогого обладнання (гамма-лічильників), а набори реагентів мають короткий експлуатаційний термін. Все це є основним недоліком такого аналізу, що визначають його дорогу вартість.
    Крім того, останнім часом РИА стали витісняти більш сучасні методи дослідження, які не потребують взаємодії з ізотопами. До таких відноситься імуноферментний аналіз. Таким чином, РИА є бажаним у багатьох клініках. У великих містах і центрах діагностики він давно використовується, але в звичайних лікарнях маленьких міст цей аналіз практично не застосовується через свою дорожнечу.
    Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

    Переваги РИА

    Радиоиммунный аналіз має безліч переваг. Він досить специфічний і має високу чутливість, що дозволяє визначити наявність біологічно активних речовин у надзвичайно малих кількостях. Проводиться цей аналіз дуже просто, від людини потрібно тільки здати венозну кров. Результати тесту виходять точними на всі 100% і готові вже на наступний день. Також РИА з легкістю можна автоматизувати. Таким чином, цей аналіз дозволяє виявляти білки, які являють собою продукти життєдіяльності інфекційних бактерій, що свідчить про наявність інфекції в організмі.
    Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

    Діагностика у вірусології

    Найперспективнішим РИА є для вірусології, оскільки дозволяє в короткі терміни виявити вірусних збудників. Пов'язано це з тим, що останнім часом зростає кількість захворюваності різними інфекціями, які розповсюджуються з великою швидкістю, викликаючи смертність серед людей. Особливо це стосується країн, які не мають високого соціального і економічного розвитку (країни Далекого Сходу), тут просто незамінний радиоиммунный аналіз. Мікробіологія також застосовує цей метод діагностики для виявлення інфекційних хвороб, які викликають патогенні бактерії. Наприклад, РИА широко використовують для виявлення черевного тифу. У перші дні недуги до призначення лікування необхідно проведення дослідження калу і блювотних мас. Однак результати діагностування будуть отримані через тривалий час. Тут на допомогу приходить РІА, аналіз дозволяє в короткий термін виявити збудника захворювання. Людина здає кров, на наступний день вже готові результати дослідження. Цей аналіз допомагає в постановці точного діагнозу.

    Підсумки

    Радиоиммунный аналіз є на даний момент одним з найбільш чутливих методів діагностування. Він використовується для аналізу будь-якого речовини, проти якого можна отримати антитіла. Цей метод дає можливість зробити безліч проб у найменшому обсязі досліджуваної рідини, а також у найкоротші терміни провести облік результатів, так як він може бути повністю автоматизований. Цей аналіз був розроблений в п'ятдесятих роках минулого століття Соломоном Берсоном. Через тридцять років він отримав широке поширення. На сьогоднішній день РИА немає стовідсоткової альтернативи, так як аналіз має високу чутливість. РИА використовують у різних галузях медицини, а також у мікробіології і вірусології.
    Радиоиммунный аналіз в мікробіології: застосування, механізм

    Наостанок

    Використання методу вірусології дуже актуально сьогодні, так як дає можливість досліджувати поширення інфекцій, поставити точний діагноз і призначити специфічне лікування. Особливо ця проблема актуальна для країн, які мають низький рівень економіки і соціального розвитку. Також цей аналіз дозволяє виявляти кількість гормонів та ферментів в організмі людини. Для того щоб отримати достовірні результати, досліджуваного потрібно тільки здати кров на аналіз. Медицина не стоїть на місці, поряд з радиоиммунным аналізом з'являються нові методи дослідження, але РИА продовжує залишатися одним з провідних в медичній діагностиці.